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UV1901PC紫外分光光度計的用法及使用過程
更新時間:2017-07-11 點擊次數:5040

UV1901PC紫外分光光度計的用法及使用過程

紫外分光光度計是根據樣品的濃度和吸光度是成正比關系的,濃度越大,吸收值越高,也就是瑯伯-比爾定律的原理研發的測試物質含量以及定性的實驗室常用儀器。它的應用領域涉及制藥、醫療衛生、化學化工、計量科學、農業、林業、漁業等領域中的科研、教學等各個方面,用來進行定性分析、純度檢查、結構分析、絡合物組成及穩定常數的測定、反應動力學研究等。

所以紫外分光光度計用的zui多的還是定量分析,定量分析的種類有很多,這里介紹常用的幾種定量分析方法:

1、法:法是紫外可見分光光度計諸多分析方法中使用zui多的一種方法。這是一種以瑯伯-比爾定律A=εbC為基礎的分析方法,某一物質在一定波長下ε值是一個常數,石英比色皿的光程是已知的,也是一個常數。因此,可用紫外可見分光光度計在λmax波長處,測定樣品溶液的吸光度值A。然后,根據瑯伯比爾定律求出C=A/εb,則可求出該樣品溶液的含量或濃度。

2、標準法:在選定的波長處,在相同的測試條件下,分別測試標準樣品溶液C標和被測試樣品溶液C樣的吸光度A標和A樣。然后,按下式求得樣品溶液的濃度或含量。

C=A/A標×C

3、標準曲線法

紫外可見分光光度計zui常用的定量分析方法是標準曲線法。即先用標準物質配制一定濃度的溶液,再將該溶液配制成一系列的標準溶液。在一定波長下,測試每個標準溶液的吸光度,以吸光度值為縱坐標,標準溶液對應得濃度為橫坐標,繪制標準曲線。zui后,將樣品溶液按標準曲線繪制程序測得吸光度值,在標準曲線上查出樣品溶液對應的濃度或含量。

4 其它分析方法

除上述幾個分析方法外經常使用的分析方法外,還有比吸收系數法、zui小二乘法、解聯立方程法和示差分光光度法。

(2) 定性分析

如果未知物的紫外吸收光譜的zui大吸收峰波長λmax、zui小吸收峰波長λmin、zui大摩爾吸光系數εmax,以及吸收峰的數目、位置、拐點與標準光譜數據*一致,就可以認為是同一種化合物。定性分析的主要目的是知道分析樣品中是什么物質。

定量分析和定性分析是分光光度計的兩大主要功能,特別是定量分析。其它的分析都應該是從這兩大種功能中發展出來的。

 

儀器的使用情況說明:

先將UV1901PC紫外分光光度計開機自檢后

UV1901PC紫外分光光度計進入自檢狀態,分別檢測微機系統、濾光片驅動馬達定位、鎢燈電壓和氘燈電流、燈源初始位,自檢氘燈能量及鎢燈能量,并自動校準波長(以氘燈譜線656.1nm為基準)。

[][]鍵選擇所需功能項,選中項將反顯,按[ENTER]鍵進入子菜單功能塊。

 

UV1901PC紫外分光光度計[GOTO WL]鍵修改波長,光標自動閃爍在波長輸入處,用數字鍵輸入您所需測定的波長值,確認后按[ENTER]鍵加以確定。(本例波長為500nm

    屏幕提示:請稍后···

UV1901PC紫外分光光度計在自動將波長調整到您所需測定的波長值。如輸入數值有錯,請按[CE]鍵清除后重新輸入。如波長選擇不在可選擇范圍內(190 nm1100nm)。

屏幕提示:輸入錯誤 

此時輸入正確波長即可

屏幕中zui下方的四個功能,分別由儀器鍵盤上的四個功能鍵來實現。

F1為您提供測試數據類型選擇:T(透射比)

F2為您提供測試數據類型選擇:Abs(吸光度)

F3為您提供測試數據類型選擇:Conc(濃度)

F4對所測得數據進行打印輸出

當您把所需參數輸入結束后,用一對配套石英比色皿倒入參比樣品(本例參比樣品為空氣)。分別放入參比光路和樣品光路。然后按下[ZERO]鍵。

    屏幕提示:Blanking  100%

儀器在自動調整0%(暗電流)及100%(滿度)。自調結束屏幕提示消失后,取出樣品光路中的比色皿,重新倒入待測樣品并放回樣品光路樣品池,蓋好樣品盒蓋,此時就可得到您所需數據。

 

 

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